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现场金相显微镜之分辨率的定义
物镜前面发光点发射的光线进入物镜的角度称开口角度。透镜的放大率与开口角度成正比,与焦距成反比。数值口径(又称开口率numerical aperture
简写为NA)是光线投射到物镜上的最大开口角度一半的正弦,乘上标本与物镜间介质的折射率的乘积。
NA=n×Sinθ
NA 为数值口径;n 是介质折射率;θ为最大开口角度的半数。
由于介质为空气时n=1,最大值只能到90 度(实际上不可能达到90
度),Sin90=1,所以干燥系下物镜的数值口径都小于l。使用油镜时,物镜与标本间的介质为香柏油(n=1.515)或液体石蜡(n=1.52),不仅能增加照明度,更重要的是增大数值口径,目前技术下最大的数值口径为1.4。
评价一台现场金相显微镜的质量优劣,不仅要看其放大倍数,更重要的是看其分辨率。分辨率是指显微镜能够辨别发光的两个点或两细线间最小距离的能力。该最小的距离称为鉴别限度(R):
R=λ/2nSinθ=λ/2NA
R 为鉴别限度;λ为光的波长。
日光的波长λ=0.5607μm≈0.6μm,如果用NA=1.4 的物镜,则
R=0.6/2×1.4=0.22μm